纺织品抗菌测试定量方法介绍:振荡法


纺织品抗菌测试的定量方法之一是振荡法,这种方法特别适用于非溶出型抗菌纺织产品,包括羽绒、纤维、纱线、织物以及特殊形状的制品等各类纺织品。振荡法的优点在于它适用于大多数类型的试样,包括粉末状、有毛或羽的衣物、凸凹不平的织物等,并且对于水溶液中非溶出型的试样也能评价其抗菌性能。
作为第三方检测中心,中科检测机构拥有CMA和CNAS认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的纺织品抗菌测试报告。
纺织品抗菌测试标准
GB/T 20944.3-2008 《 纺织品 抗菌性能的评价第3部分:振荡法》适用羽绒,纤维,纱线,织物,以及特殊形状的制品等各类纺织产品,尤其适用于非溶出型抗菌纺织织物。
将试样与对照样分别装入一定浓度的试验菌液的三角烧瓶中,在规定的温度下振荡一定时间,测定三角烧瓶内菌液在振荡前及振荡一定时间后的活菌浓度,计算抑菌率,以此评价试样的抗菌效果。
抗菌测试用细菌
应使用下列革兰氏阳性和其中一种革兰氏阴性菌种
金黄色葡萄球菌 Staphylococcusaureus(ATCC6538)革兰氏阳性,
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae(ATCC4352)革兰氏阴性,
大肠杆菌Escherichiacoli(8099或ATCC 11229)革兰氏阴性。
注1:可使用加入世界菌种保藏联合会(WFCC)的菌种保藏机构提供的、与上述菌种等效的试验细菌。
注2:根据需要,可采用其他的试验菌种,培养基成分、培养温度和培养方法可根据需要调整。
抗菌测试步骤
1、试样及试剂装瓶
准备9个250mL三角烧瓶。在其中3个烧瓶中各加入对照样0.75g±0.05g,3个烧瓶中各加入抗菌织物试样0.75g±0.05g,另3个烧瓶不加试样作为空白对照。然后在每个烧瓶中各加入70 mL±0.1mL0.03 mol/LPBS 缓冲液。
若需要,可另增加3个三角烧瓶,各装入0.75g±0.05g未经抗菌处理织物试样,并各加入70ml,±0.1ml,0.03mol/,PBS缓冲液,以考察未经抗菌处理织物试样的相关性能。
2、“0”接触时间制样
用吸管往3个对照样烧瓶和3个对照烧瓶中各加入5mL接种菌液。盖好瓶塞,放在恒温振荡器上,在 24℃±1℃,以250r/min~300r/min,振荡1min ±5s,然后进行下一步“0”接触时间取样。
3、“0”接触时间取样
用吸管在“0”接触时间制样的6个烧瓶中各吸取1mL±0.1mL溶液,移入装有9mL±0.1ml0.03moI/LPBS缓冲液的试管中,充分混匀。用10倍稀释法再进行1次稀释,充分混匀。吸取1 ml,±0.1ml.移入灭菌的平皿,倾注营养琼脂培养基或沙氏琼脂培养基约15ml。每个10^2稀释信数的试管分别吸液制作两个平板作平行样。室温凝固,倒置平板,37C±1℃培养24h~48h(白色念珠菌48h~72h)。记录每个平板中的菌落数。
4、定时振荡接触
用吸管往3个抗菌织物试样烧瓶中各加入5mL接种菌液,盖好瓶塞。已完成“0”接触时间取样且盖好瓶塞的另6个烧瓶不需再加接种液。再将此9个试样的烧瓶置于恒温振荡器上,在24℃±1℃,以150r/min,振荡18 h。
5、稀释培养及菌落数的测定
到规定时间后,从每个烧瓶中吸取1mL±0.1ml,试液,移入装有9ml±0.1mL0.03 mol/L,PBS缓冲液的试管中,充分混匀。用10倍稀释法系列稀释至合适稀释倍数。用吸管从每个稀释倍数的试管中分别吸取1mL±0.1ml,移入灭菌的平皿,倾注营养琼脂培养基或沙氏琼脂培养基约15m。每个稀释倍数的试管分别吸液制作两个平板作平行样。室温凝固,倒置平板,37℃±1℃培养24h~48h(白色念珠菌48h~72h)。
选择菌落数在30CFU~300CFU之间的合适稀释倍数的平板进行计数。若最小稀释倍数平板中的菌落数<30,则按实际数量记录;若无菌落生长,则菌落数记为“<1”。
两个平行平板的菌落数相差应在15%以内,否则此数据无效,应重作试验。
抗菌测试结果评价
1)根据两个平板得到的菌落数,计算每个试样烧瓶内的活菌浓度(保留两位有效数)。
2)计算试验菌的增长值F。对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌等细菌,当F大于或等于1.5;对白色念珠菌,当F大于或等于0.7,且对照烧瓶中的活菌浓度比接种时的活菌浓度增加时,试验判定为有效。否则试验无效,需重新进行试验。
3)振荡接触18h后,比较对照样与抗菌织物(或未抗菌处理织物)试样烧瓶内的活菌浓度,计算抑菌率(保留两位有效数)。
4)以抑菌率的计算值作为结果。当抑菌率计算值为负数时,表示为“0”;当抑菌率计算值>0时,表示为“≥0”。
对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的抑菌率≥70%,或对白色念珠菌的抑菌率≥60%,样品具有抗菌效果。
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