药敏试验是什么意思?不常见苛养菌和非苛养菌的方法和试验条件介绍

370次 2024.08.14

    检测微生物对抗微生物药物的体外敏感性,以指导临床合理选用药物的微生物学试验,简称药敏试验。药敏试验是在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验,其主要目的是预测所检抗微生物药物的治疗结果。在临床中不常见苛养菌和非苛养菌的药敏试验方法和试验条件如下文。



    作为第三方检测中心,中科检测机构拥有CMA和CNAS认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的药敏试验报告。


    1.乏养球菌属、颗粒链球菌属


    肉汤稀释法:将含半胱氨酸(或盐酸吡哆醛)的巧克力平皿或厌氧琼脂35℃ 5% CO2环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至含有0.001%盐酸吡哆醛(即10 mg/L)的CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V),在35℃空气环境下培养20 h~24 h。


    2.气球菌属


    肉汤稀释法:将血平板35℃ 5% CO2环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在35℃、CO2环境下,培养20 h~24 h。


    3.孪生球菌属


    肉汤稀释法:将血平板35℃ 5% CO2环境培养24 h~48 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在35℃、CO2环境下,培养24 h~48 h。


    4.乳球菌属


    肉汤稀释法:将血平板35℃ 5% CO2环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在35℃、CO2环境下,培养20 h~24 h。


    5.微球菌属


    肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养16 h~20 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB培养基中,在空气环境下,培养20 h~24 h。


    6.片球菌属、明串珠菌属、黏滑罗氏菌


    肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在空气环境下,培养20 h~24 h。


    7.猪红斑丹毒丝菌


    肉汤稀释法:将血平板或巧克力平皿35℃空气环境培养24 h的形成针尖养菌落(需孵育1~3天)的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在空气环境下,培养20 h~24 h。


    8.乳杆菌属


    肉汤稀释法:将血平板35℃ 5% CO2环境培养24 h~48 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在35℃、CO2环境下,培养24 h~28 h。


    9.棒杆菌属、类棒状杆菌属


    肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基(检测达托霉素时,CAMHB-LHB (2.5%~5%,V/V)中钙离子需要加至50 mg/L)中,然后在空气环境下,培养24 h~28 h(除外β内酰胺类孵育48 h,其它类抗菌药物孵育24 h可读取结果)。


    10.需氧芽胞杆菌属(不包括炭疽芽胞杆菌)


    肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养16 h~20 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB培养基中,在空气环境下,培养16 h~20 h。


    11.产单核细胞李斯特菌


    肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在空气环境下,培养20 h~24 h。


    12.卡他莫拉菌


    (1)纸片扩散法:将血平板35℃空气环境培养16 h~20 h的菌株作为接种物,接种至MHA培养基中,在35℃、CO2环境下,培养20 h~24 h。


    (2)微量肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养16 h~20 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB培养基中,在空气环境下,培养20 h~24 h。


    13.巴斯德菌属


    (1)纸片扩散法:将血平板35℃空气环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至含5%(V/V)的脱纤维绵羊血的MHA培养基中,在35℃空气环境下,培养16 h~18 h。


    (2)微量肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,在35℃空气环境下,培养18 h~24 h。


    14.气单胞菌属


    (1)纸片扩散法:将血平板35℃空气环境培养18 h~20 h的菌株作为接种物,接种至MHA培养基中,在35℃空气环境下,培养16 h~18 h。


    (2)微量肉汤稀释法:将血平板35℃ 5% CO2环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB培养基中,在35℃空气环境下,培养16 h~20 h。


    15.弧菌属(包括霍乱弧菌)


    (1)纸片扩散法:将血平板35℃空气环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至MHA培养基中,在35±2℃空气环境下,培养16 h~18 h。


    (2)微量肉汤稀释法:将血平板35℃空气环境培养20 h~24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB培养基中,在35±2℃空气环境下,培养16 h~20 h。


    16.空肠弯曲菌/大肠弯曲菌


    (1)纸片扩散法:将含5%(V/V)的脱纤维绵羊血的阳离子校正的Mueller-Hinton 琼脂平皿36℃~37℃微需氧环境(10% CO2、5% O2和 85% N2)孵育48 h或42℃微需氧环境孵育24 h的菌株作为接种物,接种至含5%(V/V)的脱纤维绵羊血的MHA培养基中,在42℃ 微需氧环境下,培养24 h。


    (2)微量肉汤稀释法:将含5%(V/V)的脱纤维绵羊血的阳离子校正的Mueller-Hinton 琼脂平皿36℃~37℃微需氧环境(10% CO2、5% O2和 85% N2)孵育48 h或42℃微需氧环境孵育24 h的菌株作为接种物,接种至CAMHB-LHB(2.5%~5%,V/V)培养基中,36℃~37℃微需氧环境孵育48 h 或42℃微需氧环境孵育24 h(孵育温度低于36℃或超过42℃均可导致细菌生长不良。)


    17.幽门螺杆菌


    琼脂稀释法:将加入血或血清的平皿36℃~37℃环境孵育72 h的菌株作为接种物,接种至加入5%(V/V)≥2周的绵羊血的 MHA培养基中,在35±2℃ 微需氧环境下,培养72 h。


    ------详见《WS/T 807-2022临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证》


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